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生化培养箱两种基本使用方法

2014-11-1 16:22:58      点击:

生化培养箱广泛应用于多个领域,下面我们就来介绍下生活培养箱的多管发酵法与滤膜法。

1.多管发酵法

初发酵实验

生化培养箱发酵管内装有单倍或三倍乳糖蛋白胨培养液,并在内倒置有小玻璃管。每个样品用三个不同的水样量接种,同一接种水样量要有五管,将水样分别接种到装有乳糖蛋白胨培养液的 生化培养箱发酵管中,在37℃±0.5℃下培养24h±2h。乳糖能起选择作用,因为很多细菌不能发酵乳糖,而大肠菌群能发酵乳糖并产酸产气。培养液中加入溴甲酚紫作为酸度指示剂,细菌产酸后,培养液即由原来的紫色变成黄色。产酸产气的发酵管表明试验阳性,如在倒管内产气不明显,可轻拍发酵管,有小气泡升起为阳性。

2.滤膜法

生化培养箱滤膜是一种微孔性滤膜,孔径0.45μm。将水样注入已灭菌的放有滤膜的过滤器中,经过抽滤,细菌即被截留在膜上,然后将滤膜贴于m-fc培养基上,在44.5℃±0.5℃下培养24 h±2h。粪大肠菌群菌落在m-fc培养基上呈蓝色或蓝绿色,其他非粪大肠菌群菌落成灰色、淡黄色或无色。正常情况下,由于温度和玫瑰酸盐试剂的选择性作用,在m-fc培养基上很少见到非粪大肠菌菌落。

复发酵实验

轻微振荡初发酵试验阳性结果的 生化培养箱发酵管,用3mm接种环将培养物(2-3环)转接到ec培养液中,在44.5℃±0.5℃下培养24h±2h(提高培养温度可造成不利于来自自然环境的大肠菌群的生长)。培养后立即观察,发酵管产气则证实为粪大肠菌群阳性。